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內(nèi)酰胺酶檢測:兩種方法教您正確進行檢測

更新時間:2023-04-19      瀏覽次數(shù):3128
       內(nèi)酰胺酶檢測的檢測速度快,所以檢測β-內(nèi)酰胺酶與常規(guī)藥敏實驗相比,能更快地獲得結(jié)果。為了保證內(nèi)酰胺酶檢測的準確性,操作人員需要按照正確的方法來進行檢測,下面我們就來介紹一下常用的兩種方法。
  1.紙片擴散法
  (1)初篩試驗∶選用頭孢泊肟、頭孢他啶、氦曲南、頭孢噻肟或頭孢曲松(每片含量均為30ug)藥敏紙片中的至少2種,用苗勒-欣頓(MHA)瓊脂,標準紙片擴散法測試抑菌環(huán)直徑,按美國臨床實驗室標準化委員會(NCC LS)1997年標準進行判斷。凡頭孢泊肟或頭孢他啶的抑菌環(huán)直徑≤22mm,頭孢曲松s25mm,氨曲南或頭孢噻肟≤27mm,均應(yīng)高度懷疑為ESBLs菌株,應(yīng)進一步作確認試驗來加以確診。
  (2)表型確證試驗∶用頭孢他啶(每片30ug)和頭孢他啶加克拉維酸(30ug和10ug);頭孢噻骯(每片30ug)和頭孢噻肟加克拉維酸(30ug和10ug);分別測量2種紙片單獨及加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑。加克拉維酸和不加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑≥5mm可確認為ESBLs菌株。
 ?、?微量肉湯稀釋法
  (1)初篩試驗︰原理同ESBLs紙片擴散法步驟∶將大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌配成相應(yīng)濁度的菌懸液,加入含有以下濃度藥物的微量反應(yīng)板中,頭孢泊肟、頭孢他啶、氦曲南、頭孢噻腸、頭孢曲松。然后將接種了待測菌的反應(yīng)板置于35℃環(huán)境下,孵育16~18小時后觀察細菌在不同藥物中的生長現(xiàn)象。
  (2)表型確證試驗∶按照藥敏試驗的微量肉湯稀釋法,將大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌配成相應(yīng)濁度的菌懸液,加入含有以下梯度濃度藥物的微量反應(yīng)板中,頭孢他啶的濃度范圍為0.25~128ug/ml,頭孢他啶/克拉維酸為0.25/4~128/4ug/ml,頭孢噻肟為0.25~64ug/d,頭孢噻污/克拉維酸為0.25/4~64/41ug/ml。置于35℃環(huán)境下,孵育16~18小時后觀察在不同濃度藥物中的生長現(xiàn)象。
  以上就是內(nèi)酰胺酶檢測常用的兩種方法,希望能幫助大家更好地進行檢測并保證其檢測的準確性。
 

內(nèi)酰胺酶檢測

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